您好,欢迎访问上海优德体育商贸有限公司

北京核酸纯化试剂批发价格-沃鎏波洱
发布时间:2019-02-07 02:30浏览次数:

  AD+/NADH分析试剂盒关键特征:灵敏准确。在96孔板测定中,检出限为0.05μm,线μmNAD+/NADH。方便。该方法包括加入单一工作试剂,在室温下读取时间为零和15分钟的光密度。高通量。可以作为一个高通量96孔板法每天数千次样品自动检测。应用:细胞内或组织提取物中NAAD+/NADH的浓度和比值。贮存条件:这套试剂盒是用冰装运的,所有试剂储存在-20°C。

  特点:从土壤或其他环境样品中存在的细胞中分离DNA,使用FastPrep®24或FastPrep®FP120仪器快速和可重复的样品溶解,很容易从许多不同类型土壤中的各种生物中分离DNA,在不到60分钟内溶解和分离DNA,不需要危险的有机试剂。沃鎏波洱总蛋白提取试剂盒,货号:PROTTOT-1KT,提供了四种可提高溶解性的提取试剂。

  土壤Fast DNA SPIN试剂盒,货号:116560-200,旨在有效地从土壤和其他环境样本中分离细菌、真菌、植物和动物基因组DNA。它能在不到60分钟的时间内从土壤样品中快速有效地分离出PCR就绪的基因组DNA。我们可提供适用于各种规模质粒DNA纯化的试剂盒。在进行大量制备时(如midiprep、maxiprep、megaprep和gigaprep),提供了简单的重力流和真空辅助过滤装置来加速并简化细菌裂解液澄清。

  沃鎏波洱提供的LDH乳酸脱氢酶活性检测试剂盒,货号:MAK066,定量各种生物样品中的LDH活性,如血清、血浆、细胞、培养基和发酵培养基等。该方法快速、简便、灵敏。在该试剂盒中,LDH将NAD还原为NADH,这是通过比色法(450nm)特异性检测的。本产品仅供研发使用,不供药品、家用或其他用途。请查阅《安全数据表》,了解有关危险及安全处理措施的信息。

  仅供研究使用(RUO)。除非产品目录或其他公司文件中另有说明,我们的产品仅用于研究用途,不用于任何其他用途,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、体外或体内治疗用途或任何类型的消费。或应用于人类或动物。试剂盒采用了成熟的硅胶膜技术,避免了旧方法所需的复杂步骤。低通量样本(单一样本)和高通量样本(96样本和384样本)应用。

  去除密封膜并添加100μl终止溶液[注意:腐蚀性溶液],并用手摇板,以确保在所有孔内溶液完全混合。酸化后蓝色应变成黄色。擦拭微量滴定板的底部去除残留,然后放入平板读数器。5分钟内,在450nm和590nm处读出吸光度,注意确保孔内没有气泡。cAMP酶免疫测定法可以测很多含cAMP的样品。只要将样品充分稀释到测定缓冲液2(>1∶10)中即可。直接从标准曲线读取计算浓度。注:样品含兔IgG可能干扰检测。如果检测cAMP水平非常低的样品,则提供乙酰化样品和标准。样品乙酰化增加测定的灵敏度。

  用于从土壤和其他环境样本中分离细菌、真菌、动植物基因组DNA。从细菌蛋白提取试剂盒中取出裂解细菌裂解试剂,在室温下储存裂解细菌裂解试剂。其余的试剂盒储存在-20℃下。如果储存适当,裂解B加试剂盒和裂解B细菌裂解试剂盒都稳定至少一年。

  裂解基质E 50X 2毫升管,磷酸钠缓冲液60毫升,MT缓冲液8毫升,PPS溶液25毫升,结合基质66毫升,每个旋转模块50个,捕获管50个,浓缩SEWSM 12毫升,DES 20ml,BBS凝胶负载染料200 L。叶绿体分离试剂盒为从植物叶片中分离完整的叶绿体提供了有效的方法。该方法包括机械式细胞壁和细胞膜破坏、过滤法细胞碎片收集和叶片组织、离心法叶绿体分离、采用Percoll?分层液或梯度法法从破碎的叶绿体之中分离完整的叶绿体。

  土壤;粪便;环境水;废水;污泥。最大取样量500mg。这些蛋白质然后从顺式,通过内侧,发展到反式高尔基体。在路上,根据其结构和目的地,这些蛋白质受到不同的修饰。

  沃鎏波洱提供的细胞毒性检测试剂盒(货号:L3224)简单应用于各种技术和细胞类型由于活细胞的显著特点是普遍具有细胞内酯酶活性以及完整的细胞质膜。细胞毒性检测试剂盒LIVE/DEAD?Viability/可快速从死亡细胞中区别活细胞,其原理是:采用绿色荧光钙黄绿素-AM同时对细胞进行染色,能够显示细胞内酯酶活性,而红色乙锭二聚体-1能够显示细胞质膜完整性的缺失。这种情况发生在大部分真核细胞中,细胞毒性作用都能够产生这些效果。本试剂盒适用于各种荧光检测方法。

  沃鎏波洱提供的土壤Fast DNA SPIN试剂盒可在30分钟内快速有效地从任何环境样本(土壤、沉积物、污泥、堆肥、肥料、根际或废水)中分离出可直接PCR的基因组DNA。这种组合使得您可以比较通过四种试剂各自获得的蛋白提取物并进行优化,从而满足您的个性化需要。

  在13种评估方法中,土壤Fast DNA SPIN试剂盒显示了三种建筑材料的最佳结果。因此,土壤Fast DNA SPIN试剂盒也被称为建筑材料中室内真菌和细菌定量的金标准。用Invitrogen?Platinum?SuperFi?DNA聚合酶等高保真校正聚合酶进行PCR扩增时,由于这些酶具有3至5外切酶活性,因此扩增的片段为平末端,而非带3-A尾的PCR产物。

  沃鎏波洱提供的LDH乳酸脱氢酶活性检测试剂盒,货号:MAK066,定量各种生物样品中的LDH活性,如血清、血浆、细胞、培养基和发酵培养基等。该方法快速、简便、灵敏。在该试剂盒中,LDH将NAD还原为NADH,这是通过比色法(450nm)特异性检测的。本产品仅供研发使用,不供药品、家用或其他用途。请查阅《安全数据表》,了解有关危险及安全处理措施的信息。

  土壤样品存在大量的抑制因子如腐殖酸、金属离子等,而纯化的DNA 中只要有这些微量物质的存在,都会影响到PCR等酶促反应。本公司的土壤试剂盒采用独特的腐殖酸去除液(缓冲液R2)能够有效去除腐殖酸;吸附柱CG能能有效去除金属等抑制因子,提纯得到的基因组DNA可直接用于PCR 反应,酶切或定量实验。

  在显微镜荧光素长波光滤光片下观察(荧光素和罗丹明)。在健康细胞中,线粒体将线粒体内DePsipherTM聚集后呈红色。红色聚集体的最大发射波长为590nm。在垂死的细胞中或具有破坏电位的细胞,染料将保持其单体形式在细胞质呈绿色,最大发射波长为530nm。沃鎏波洱提供的DePsipher?线粒体膜电位检测试剂盒DePsipherTM可用于快速评估细胞群体的生存能力评估药物或其他细胞毒素对细胞群的影响,并检测已知模型中的早期凋亡。

  ● 准备工作:1. 准备55℃,70℃水浴;无水乙醇;异丙醇;制冰机;1.5ml离心管;2ml离心管。溶酶体还含有脂肪酶、核酸酶和多糖酶,缺失这几种酶会导致特定的溶酶体贮积疾病,如台-萨氏综合征(TaySachs)、戈谢病(Gaucher)、亨特氏综合症(Hunterdisease)等疾病。

  2. 按照标签所示在漂洗缓冲液WB2中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。线粒体是真核细胞产生能量的主要场所,具有双膜结构:外膜和折叠内膜。分离的线粒体是体外研究的有用工具,如呼吸和能量产生研究、细胞凋亡、线粒体DNA和线粒体RNA以及线. 每次使用前请检查缓冲液R2,缓冲液R3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。沃鎏波洱提供的内质网分离试剂盒,货号:ER0100,含有制备各种纯度的ER所需的所有试剂:粗面ER(微粒体)、Ca2+沉淀粗面ER(RER)富集微粒体,以及密度梯度纯化所得的粗面ER(RER)和滑面ER(SER)。

  ● 标准操作步骤:如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

  1. 称0.3-0.5 g土壤置于2ml离心管中,加入0.4 g Glass Beads,再加入780 l 缓冲液R1与100 l 缓冲液R2。涡旋器高速震荡3-5min。溶酶体是在大多数原核和真核细胞中普遍存在的细胞器。它们含有参与细胞内蛋白降解的酸性水解酶。

  去除密封膜并添加100μl终止溶液[注意:腐蚀性溶液],并用手摇板,以确保在所有孔内溶液完全混合。酸化后蓝色应变成黄色。擦拭微量滴定板的底部去除残留,然后放入平板读数器。5分钟内,在450nm和590nm处读出吸光度,注意确保孔内没有气泡。cAMP酶免疫测定法可以测很多含cAMP的样品。只要将样品充分稀释到测定缓冲液2(>1∶10)中即可。直接从标准曲线读取计算浓度。注:样品含兔IgG可能干扰检测。如果检测cAMP水平非常低的样品,则提供乙酰化样品和标准。样品乙酰化增加测定的灵敏度。

  注意:对含水量丰富的样品,可以预先离心除去部分水分后再称取样品。缓冲液R2是腐殖酸去除剂,100l对大部分样品来说足以有效除去腐殖酸等抑制因子。对一些腐殖酸含量特别丰富的土壤, 缓冲液R2的量可以适当增加,但不能超过250l,否则会严重影响DNA的得率。这种独特的材料树脂具有极佳的结合能力、高流速、高分辨率、高产量,且能高效去除内毒素。

  2. 加入200 l 缓冲液R3(R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用),涡旋混匀。 70℃水浴处理10min。期间振荡几次。作为真核细胞能产生能量的地点,线粒体的特征是双层膜结构:外膜和折叠的内膜。分离所得的线粒体可用作进行体外研究的工具,如呼吸和能量生成研究,凋亡、mtDNA和mtRNA、以及线粒体蛋白谱分析。

  注意:如果要纯化革兰氏阳性菌的DNA,请在70℃处理完后,再90℃水浴处理2min。

  3. 12000 rpm(~13,000g)离心1分钟,取600l上清到1.5ml离心管中,加入180 l 缓冲液R4混匀。沃鎏波洱提供的高尔基体分离试剂盒可用于通过不连续密度梯度分离法从哺乳动物软组织中分离高尔基膜。

  4. 冰上放置5分钟。12000 rpm(~13,000g)离心1分钟。 转移上清到新的1.5ml离心管中。这些蛋白质然后从顺式,通过内侧,发展到反式高尔基体。在路上,根据其结构和目的地,这些蛋白质受到不同的修饰。

  注:转移上清时确保不要吸取到沉淀,转移的上清量最好不超过80%。叶绿体分离方法包括机械细胞壁和膜破裂、通过过滤去除细胞碎片和未破碎的叶组织、通过离心收集总细胞叶绿体、以及使用Percoll_层或梯度从破碎的叶绿体中分离完整叶绿体。

  5. 加入0.7倍上清体积的异丙醇颠倒混匀。12000 rpm(~13,000g)离心2分钟。小心地倒掉上清。从细菌蛋白提取试剂盒中取出裂解细菌裂解试剂,在室温下储存裂解细菌裂解试剂。其余的试剂盒储存在-20℃下。如果储存适当,裂解B加试剂盒和裂解B细菌裂解试剂盒都稳定至少一年。

  注:如果样品中DNA含量很低,加入异丙醇混匀后-20℃放置1小时。使用前务必将所有溶液充分混合。以无菌方式从试剂盒组件中移除aliquots。酵母蛋白提取试剂盒给出的量用于从2×109酿酒酵母细胞(180-200mg)中提取蛋白质。

  6. 加入350l 缓冲液R5,待沉淀完全溶解后加入300l无水乙醇,混匀。大部分分离的线粒体将包含完整的内膜和外膜。外膜的完整性可以通过观察细胞色素c氧化酶活性(编号为CYTOCOX1)来测定,内膜的完整性可以通过柠檬酸合成酶活性(编号为CS0720)的测量来评估。

  注:为加速溶解沉淀,可置样品于55℃水浴中。使用前务必将所有溶液充分混合。以无菌方式从试剂盒组件中移除aliquots。酵母蛋白提取试剂盒给出的量用于从2×109酿酒酵母细胞(180-200mg)中提取蛋白质。

  7. 将上步混合液转移到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12000rpm离心30秒,倒掉滤过液。内质网(ER)是由互连的小管、小泡和扁囊组成的网络。其在各种细胞特殊功能中发挥着重要作用,包括蛋白质合成、钙隔离、类固醇生产、糖原储备和生产、膜蛋白嵌入等。

  8. 向吸附柱CG中加入500l 漂洗缓冲液WB1,12,000 rpm (~13,000×g ) 离心30 秒,倒掉废液。我们可提供适用于各种规模质粒DNA纯化的试剂盒。在进行大量制备时(如midiprep、maxiprep、megaprep和gigaprep),提供了简单的重力流和真空辅助过滤装置来加速并简化细菌裂解液澄清。

  9. 向吸附柱CG中加入600l 漂洗缓冲液WB2(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm (~13,000g) 离心30秒,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。

  注:此步骤非常重要,其目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。

  注; = 1 \* GB3 ① 洗脱缓冲液体积最好不少于50 l,体积过小影响回收效率。可以使用适当的标记物检测试剂盒测量与其他细胞器的分离(参见用于测量酶活性的附加试剂盒)。

  = 2 \* GB3 ② 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。

  2. 加入600l 缓冲液R3,涡旋混匀。70℃水浴处理10分钟。期间振荡几次。细菌蛋白提取试剂盒含有裂解革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌所需的所有试剂和化学品。该试剂盒还含有蛋白酶抑制物,有助于防止蛋白水解。

  3.3000g离心3分钟,转移上清到新的离心管中,加入550l 缓冲液R4混匀。溶酶体是在大多数原核和真核细胞中普遍存在的细胞器。它们含有参与细胞内蛋白降解的酸性水解酶。

  5. 以下按标准操作步骤的第五步继续操作。沃鎏波洱提供的溶酶体分离试剂盒,货号:***ISO1-1KT,提供了一种可通过不同的离心分离方法及之后的密度梯度离心和/或钙沉淀法,从动物组织或培养细胞中分离溶酶体的方法。

  果糖-6-磷酸(F6P)是由磷酸葡萄糖异构酶异构化6-磷酸葡萄糖而产生的糖酵解途径中间体。F6P进一步磷酸化成1,6-二磷酸果糖,随后裂解成磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮。F6P也可以从糖酵解分流到戊糖磷酸途径的非氧化分支,作为生成用于核苷酸合成的戊糖磷酸酯的手段。在快速增殖的细胞,如癌细胞中,F6P水平升高。沃鎏波洱提供的果糖-6-磷酸测定试剂盒,货号:MAK020-1KT,是一种高灵敏、简便的基于荧光的多种样品中F6P的定量方法。

  ● DNA浓度及纯度检测:基因组DNA*(代片)段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代片)段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.71.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。

  线粒体跨膜电化学梯度的破坏是诱导细胞凋亡后发生的早期细胞内事件之一。沃鎏波洱提供的DePsipher?线粒体膜电位检测试剂盒,货号:6300-100-K,使用亲脂阳离子来识别线粒体膜电位的变化,以达到检测细胞凋亡的目的。正常健康细胞中,DePsipher试剂在线粒体中聚集形成橙色荧光化合物。然而,在凋亡细胞中,当线粒体膜电位被破坏时,DePsipher试剂保持其单体形式并且荧光呈绿色(如下图)。荧光的这些变化可以通过显微镜或流式细胞术监测。

  没有洗脱出DNA 加入缓冲液R5后没有加入无水乙醇 样品过柱前,必须用无水乙醇调整核酸结合条件,否则核酸不能挂柱。

  漂洗缓冲液WB2中没有加入乙醇 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。

  洗脱体积太小 洗脱体积不能低于50l,如洗脱体积太小,回收率将大大降低。

  AnnexinV是一种35-36kDaCa2+依赖性磷脂结合蛋白,对PS具有高亲和力,与PS暴露的细胞结合。这种形式保留了它对PS的高亲和力,因此用作流式细胞术分析正在经历凋亡的细胞的敏感探针。由于PS的外显化发生在凋亡的早期阶段,因此PE膜联蛋白V染色比基于DNA片段化等核变化的检测能更早地识别凋亡。丙酮酸激酶(PK)是催化糖酵解途径中最后一步的酶,能催化将磷酸基团从磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)转移到ADP,生成一分子丙酮酸盐和一分子ATP。

  洗涤不恰当 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。无水乙醇加入量不正确会导致核酸提取量大大降低。

  低A260/A280比率 蛋白污染 不要忽略步骤8中用漂洗缓冲液WB1冲洗吸附柱

  洗脱液pH值不合适 确保使用的洗脱液pH在8.0以上,如低于8.0将导致DNA洗脱量过低。

  下游应用不好 提取的DNA含盐量高 漂洗缓冲液WB2使用前请按照标签加入无水乙醇。

  北京核酸纯化试剂批发价格-沃鎏波洱提取的DNA含有乙醇 步骤11空甩柱子2分钟非常关键,彻底去除漂洗液中的乙醇。

  抑制PCR反应 增加缓冲液R2用量,彻底去除腐殖酸等PCR抑制因子;步骤4中确保不要吸取到沉淀。

  利用病毒、DNA、RNA、.NA和蛋白质的各种方法已经被开发出来产生无整合诱导多能干细胞(iPSCs)。现有方法的缺点包括:(1)重编程效率低(即DNA和蛋白质),(2)需要长时间的负选择和亚***步骤以去除病毒(即仙台病毒)1的持续痕迹,(3)14天内每天转染四个体外产生的mRNA(即基于mRNA)2。为了最大限度地提高RNA转染效率,必须针对每种细胞类型优化以下参数:细胞密度、RNA3’尾部和5’帽、RNA纯度水平、RNA数量、核糖浆试剂的体积、转染培养时间、转染介质和细胞培养条件。

      优德娱乐,优德体育

 网站地图